WWW.KONFERENCIYA.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Конференции, лекции

 

Pages:     | 1 |   ...   | 5 | 6 || 8 |

«Том II Ульяновск - 2013 Материалы международной научно-практической конференции Бактериофаги: Теоретические и практические аспекты применения в медицине, ветеринарии и пищевой ...»

-- [ Страница 7 ] --

Учет результатов проводили через 12-16 часов инкубирования. С этой целью подсчтывали число негативных колоний фага, выросших на питательной среде в опытной пробе и в контроле (контроль титра фага). Оценку РНФ проводили согласно таблицы 1. В случае наличия в исследуемом материале свободного фага число корпускул свободного фага число корпускул фага на чашке подсчитывали и вычитали из числа корпускул индикаторного фага в опытных чашках. Разницу сравнивали с контролем. При высоком титре свободного фага (сплошной лизис индикаторной культуры) реакция не учитывалась. РНФ, оцененная как сомнительная, не имела диагностического значения.

Таблица 1 - Показатели увеличения титра фага в РНФ Увеличение количества частиц бактериофага в опытной по отОценка результатов В случае наличия в исследуемом материале свободного фага число корпускул фага.

По результатам проведенных опытов установлено, что количество фаговых частиц более чем в 5 раз превышает количество фаговых частиц в контрольных пробах при контамнации МПБ E. О157 в концентрации 103 микробных клеток эшерихий в 1 мл МПБ.

Для установления оптимального времени, обеспечивающего наиболее полноценное взаимодействие фага с бактериями, необходимо было провести эксперименты на тест- объекте по выявлению наиболее эффективного временного показателя взаимодействия фага и индикаБактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности торной культуры при сохранении остальных параметров (температурный режим, концентрация бактериальной культуры и фаговых корпускул в 1 мл) постановки РНФ. В качестве тестобъекта использовали МПБ, оптимальное время экспозиции выбирали из шести следующих параметров:

в предварительном подращивании исследуемого материала в течение 5, 16, 24 часов при температуре 37°С, после добавления фагов смесь выдерживали в течение 5 часов при температуре 37°С;

в увеличении времени контакта исследуемого материала с фагом до 10, 16 и 24 часов при температуре 37 С.

Для изучение чувствительности РНФ в зависимости от времени подращивания МПБ контаминировали бактериями E. О157 в контаминации 101-105м.к/м и инкубировали в термостате при температуре 37°С в течение 5, 16 и 24 часов. Результаты исследования представлены в таблице 2.

Таблица 2 - Чуствительность РНФ в зависимости от времени подращивания исследуемого материала, контаминированного E. О Установлено, что при подращивании материала в течение 5-ти часов позволяет обнаружить эшерихии с помощью РНФ в концентрации 103 м.к./мл. При подращивании исследуемого материала в течение 16 часов чувствительность реакции повышается и позволяет обнаружить бактерии в количестве 102 м.к/мл. На проведение исследования затрачивается часа. Бактериологическим методом это же количество эшерихий обнаружить не удавалось.

При подращивании исследуемого материала в течение 24 часов чувствительность реакции не увеличивается, также позволяет обнаружить бактерии в количестве 102 м.к/мл. На проведение этого варианта реакции необходимо 40 часов.

Во втором варианте опыта МПБ, контаминированный E. О157 штаммами РЛ и №51659 от 101 до105 м.к./мл не подращивали, а увеличивали время контакта материала с фагом до 10, 16, 24 часов. Результаты представлены в таблице 3.

Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности Таблица 3 - Чуствительность РНФ в зависимости от времени инкубирования исследуемого материала с фагом Е-61 УГСХА п.п. подращивания По результатам изучения чувствительности РНФ в зависимости от времени инкубирования исследуемого материала с фагом установлено, что увеличение времени до 10-ти часов позволяет обнаружить эшерихии с помощью РНФ в концентрации 103 м.к./мл. При инкубировании исследуемого материала с фагом в течение 16 часов чувствительность реакции повышается, что позволяет обнаружить бактерии в количестве 102 м.к/мл. На проведение исследования затрачивается 32 часа. Бактериологическим методом это же количество эшерихий обнаружить не удавалось. При инкубировании с фагом исследуемого материала в течение 24 часов чувствительность реакции не увеличивается и позволяет обнаружить бактерии в количестве 102 м.к./мл.. На проведение этого варианта реакции необходимо 40 часов. Бактериологическим методом E. О157 удавалось обнаружить в концентрации 104 м.к./мл, на проведение исследования затрачивается 96 часов.

На основании наших данных, считаем, что наиболее эффективными являются режимы РНФ при 5 часовой экспозиции исследуемого материала с фагом, когда удается провести индикацию бактерий в количестве 103 в миллилитре исследуемого субстрата, на исследование которого затрачивается 16-18 часов, поэтому данный режим используем в дальнейших исследованиях, хотя наиболее эффективным по чувствительности является инкубирование исследуемого материала с фагом в течение 16 часов на которое затрачивается до 32 часов.

1. Адамс М. Бактериофаги (перевод с англ.)//М., 1961.-521 С.

2. Ганюшкин В.Я. Реакция нарастания титра фага при диагностике паратифа поросят.

// Ветеринария. № 3, 1967, с. 69-71.

3. Гольдфарб Д.М. Бактериофагия.// М.: Медгиз., 1961, -297С.

4. Ляшенко Е.А., Золотухин С.Н.. Васильев Д.А. Разработка и применение фагового биопрепарата для диагностики клебсиеллезной инфекции // Вестник ветеринарии, Том 59, Ставрополь, 2011 с. 90-92.

5. Покровский В.И., Полоцкий Ю.Е., Ющук Н.Д., Бондаренко В.М. // Журн. микробиол., № 4, 1989, с. 80-87.

6. Тугаринов О.А., М.К.Пирожков, Ю.А.Малахов Сборник научных трудов.



//М.:ВГНКИ, Т.62, 2001, с. 68-75.

Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности 7. Ратинер Ю.А., Канарейкина С.К., Бондаренко В.М. // Журнал микробиологии., № 5, 1976, с. 117-121.

8. Armstrong G.L., Hollingsworth J., Morris J.G. Persistence of Eschericia coli 157:H7 in dairy cattle and the dairu farm environment. // Epidemiol. Rev., V. 18, 1996, р. 29 - 51.

9. Tuttle J., Gomez T., Doyle M.P., Wells J.G., Zhao T., Tauxe P.V., Griffin P.M. Enterohemorrhagic Escherichia coli. // Epidemiol.fnd Infec., - V. 122, №2, 1999, р.185-192.

THE DEVELOPMENT OF PARAMETERS OF THE ACCELERATED

IDENTIFICATION OF BACTERIA ESCHERICHIA COLI О157 WITH THE

HELP OF THE REACTION OF RISE OF TITRE OF THE PHAGE

Моlofeeva N.I., Vasilev D.А., Zolotukhin S.N.

Кey words: etfit, bter, bterphge, the ret f re f ttre f the phge.

etfit f bter f the geu Eherh О157 wth the hep f the ret f re f ttre f the phge.

УДК 619:

ПРИМЕНЕНИЕ РЕАКЦИИ НАРАСТАНИЯ ТИТРА ФАГА

ДЛЯ ИНДИКАЦИИ АЭРОМОНАД В РЫБНОЙ ПРОДУКЦИИ

Насибуллин И.Р., соискатель,, nir72@mail.ru Горшков И.Г., научный сотрудник, i.o.gun@mail.ru Куклина Н.Г., научный сотрудник, ul_nk@mail.ru Викторов Д.А., кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, viktorov_da@mail.ru Васильев Д.А., доктор биологических наук, профессор Тел. 8(8422) 55-95-47, dav_ul@mail.ru Нафеев А.А., доктор медицинских наук, nafeev@mail.ru Ключевые слова: Aer, бактериофаги, биопрепарат, индикация, реакция нарастания титра фага.

Авторами выделены бактериофаги бактерий вида Aer hyrph, исследованы их основные биологические свойства и разработан диагностический биопрепарат. На основе созданного биопрепарата предложен новый метод индикации Aer hyrph с применением реакции нарастания титра фага.

Введение. Бактерии рода Aer широко распространены в окружающей среде и известны как возбудители аэромоноза – инфекционного заболевания многих видов рыб и других гидробионтов. Аэромоноз встречается повсеместно и наносит значительный экономический ущерб рыбоводческим хозяйствам. Контаминированная аэромонадами рыбная продукБактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности ция представляет собой источник серьезных заболеваний человека и животных.

При возникновении в хозяйстве аэромоноза на него накладывают карантин, выполняют ветеринарно-санитарные и рыбоводно-мелиоративные мероприятия согласно действующей инструкции [3, 4]. Для лечения аэромоноза рыб в хозяйствах применяют антибиотики широкого спектра действия и другие антисептические средства. Согласно инструкции активно применяются такие препараты как: дибиомицин, бацилихин, ветдипасфен, кронолактон, фуразолидон, хлорная и гашенная известь. Все эти препараты накапливаются в тканях рыб и других гидробионтов и попадают в дальнейшем в пищевое сырье и продукцию.

Применение этих препаратов приводит к уничтожению полезной сапрофитной микрофлоры водоемов, микрофлоры кишечника рыб и гидробионтов, появлению антибиотикорезистентных бактерий. Меры профилактики согласно инструкции требуют от хозяйств проведения ряда сложных и затратных мероприятий, связанных с дезинфекцией бассейнов и инвентаря, созданием оптимальных зоогигиенических, гидрологических и гидрохимических условий [3].

Диагноз на аэромоноз устанавливают на основании эпизоотологических данных, клинических признаков болезни, патологоанатомических изменений, а также результатов бактериологического исследования [4].

Индикация и идентификация аэромонад является трудоемким и длительным (до часов) процессом. Типирование до рода Aer требует применения сложных и дорогостоящих сред и проведения ряда узких тестов, что обуславливает недостоверность исследования.

Внутривидовая идентификация из-за незначительных различий между видами сложна и может служить причиной ошибок.

В связи с этим возникла необходимость использования новых методов индикации бактерий рода Aer, обладающих следующими критериями: кратчайшие сроки исследования, простота в применении, высокая чувствительность и специфичность. Для этих целей нами разработан биопрепарат на основе выделенного и изученного бактериофага Ф43-УГСХА и параметры его применения в схеме реакции нарастания титра фага (РНФ).

Материалы и методы исследования.

В качестве исходного материала при выделении бактериофагов были использованы 103 пробы воды водоемов Ульяновской области. В качестве индикаторной культуры использовали референс-штамм A.h.-43, полученный из музея кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы Ульновской ГСХА им. П.А. Столыпина.

Посевы инкубировали при температуре 35 С в течение 24-48 часов. Выделение и изучение биологических свойств фагов проводили по методам Д.М. Гольдфарба (1961), И.П. Ревенко (1978), И.М. Габриловича(1973), С.Н. Золотухина (2007), Д.А. Викторова (2011). Для получения негативных колоний бактериофагов использовали метод агаровых слоев по Грация. Повышение литической активности проводили пассированием на индикаторной культуре. Литическую активность определяли методами Аппельмана и Грации. Для определения спектра литической активности применяли референс-штамм и выделенные нами ранее 14 полевых штаммов. Для определения специфичности использовали штаммы бактерий других родов:





Prteu, Mrge, Kebe, Bu, trbter, Yer, Peu, полученные из музея кафедры. Все штаммы обладали типичными биологическими свойствами. Реакцию нарастания титра фага проводили по методам В.Д. Тимакова, Д.М. Гольдфарба и В.Я. Ганюшкина.

Результаты исследований.

Препарат бактериофага Ф-43 УГСХА обладает всеми необходимыми для проведения РНФ свойствами: титр бактериофага 2 х 10-8, спектр литической активности 86,7 %, строгая специфичность по отношению к бактерии A. hyrph.

В результате серии исследований была разработана схема постановки РНФ с испольБактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности зованием биопрепарата бактериофага Ф-43 УГСХА, представленная на рисунке № 1.

Рис. 1 - Схема реакции нарастания титра фага для индикации Aer hyrphИсследуемый материал весом 5 г растирается в фарфоровой ступке и вносится в колбы, содержащие по 50 мл питательного бульона (МПБ). Содержимое колб культивируется в течении 5 часов при 28 С для предварительного подращивания бактерий. На каждую исследуемую пробу отводится три пробирки: №1- предназначена для опытной пробы, №2- является контролем на свободный фаг, №3- контроль титра индикаторного фага. Исследуемый материал разливается по 9 мл в пробирки №1 и №2, пробирки №3 содержат 9 мл МПБ. В пробирки №1 и №3 добавляется по 1 мл бактериофага Ф43- УГСХА в рабочем разведении (титр бактериофага 104), а пробирки №2-1 мл МПБ. Все пробы инкубируются в термостате при температуре 28 С 7 часов. Параллельно ставится контроль стерильности сред. После инкубации из пробирок берутся пробы по 0.25 мл, вносятся в пробирки с 4,5 мл МПБ и обрабатываются фильтрованием через бактериальные фильтры или хлороформом 1:10 в течении 20 минут. Далее содержимое пробирок исследуется методом агаровых слоев по Грации. Чашки инкубируют 12 часов при 28 С.

Реакция считается положительной при нарастании титра фага в 5 и более раз.

Таким образом, разработанная схема РНФ с использованием биопрепарата бактериофага Ф-43 УГСХА позволяет проводить индикацию Aer hyrph в различных объектах количестве от 103 м.к./мл в течении 24 часов.

Метод РНФ с использованием биопрепарата бактериофага Ф-43 УГСХА имеет ряд существенных преимуществ: время на исследование сокращается до 24 часов, реакция обладает Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности высокой чувствительностью, высокой специфичностью, не требует выделения культуры чистой культуры возбудителя, не требует дорогостоящего оборудования и материалов, методика достаточно проста.

Все перечисленное позволяет судить о высокой экономической эффективности метода РНФ в сравнении с существующими методами индикации аэромонад [2].

1. Викторов, Д.А. Разработка методов диагностики, лечения и профилактики псевдомоноза рыб с использованием биопрепарата на основе бактериофагов / Д.А. Викторов, О.А.

Тен, И.И. Богданов // Актуальные вопросы микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и биотехнологии: Материалы III-й Международной научно-практической конференции молой дых учёных Молодёжь и наука XXI века, Ульяновск, 2010. – Т. 3. – С. 6-8.

2. Ганюшкин В.Я. Бактериофаги и их применение в ветеринарии.- Ульяновск, 1988, с.45.

3. Инструкция о мероприятиях по борьбе с аэромонозом карповых рыб, Минсельхозпрод России, Департамент ветеринарии, 1998.

4. Методические указания по лабораторной диагностике аэроманоза карпов, Госагропром СССР, М.,1986.

APPLICATION OF THE METHOD OF REACTION OF RISE OF TITRE

OF PHAGE TO DISPLAY AEROMONADS IN FISH PRODUCTS

Nasibullin I.R., Gorshkov I.G., Кuklina N.G., Viktorov D.А., Key words: Aer, bterphge, bg prut, t, repe phge tter re.

The uthr etfie bterphge f bter pee Aer hyrph, vetgte ther b bg prperte evepe gt bpreprt. the b f rete preprt ew eth f t f Aer hyrph wth the ue f the ret f re f ttre f the phge w uggete.

УДК 619:616-

ПОЛУЧЕНИЕ СУХИХ ЛЕЧЕБНЫХ ПРЕПАРАТОВ БАКТЕРИОФАГОВ

С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ КОМПОНЕНТОВ КОММЕРЧЕСКИХ КОРМОВ

Перелыгин В.В., кандидат биологических наук, снс, тел. 8 (4967) 36-00-27, Perelygin@obolensk.org Светоч Э.А., доктор ветеринарных наук, профессор, ГНЦ ПМБ, тел. 8(4967) 36-00-79, Svetoch@obolensk.org Похиленко В.Д., доктор технических наук, Веревкин В.О. кандидат медицинских наук, Воложанцев Н.В. кандидат биологических наук, nikvol@obolensk.org Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности ФБУН «ГНЦ прикладной микробиологии и биотехнологии» Роспотребнадзора Ключевые слова: Бактериофаги, обезвоживание, инкапсулирование, компоненты кормов, лечебный препарат, энтеробактерии.

Работа посвящена биотехнологии приготовления сухих лечебных препаратов бактериофагов на основе компонентов коммерческих кормов для лечения и профилактики заболеваний, вызванных патогенными энтеробактериями. олученные композиции фагов и препараты лечебных кормов были исследованы на лабораторных животных и птице при различных условиях введения, в том числе и при предъявлении через корм. Во всех случаях получены положительные результаты, однозначно свидетельствующие о высокой эффективности композиции специфических бактериофагов (SG-3, SG-6, 11 и F62), а также (V7811, V7817), инкорпорироSG-3, -6, ванных в состав сухих кормов, для лечения и профилактики сальмонеллезной и эшерихиозной инфекций у животных и птицы Введение. Одним из основных источников кишечных заболеваний человека являются продукты питания, в том числе продукты птицеводства (мясо и яйцо), инфицированные патогенными микроорганизмами, особенно представителями родов Se и Eherh.

Использование антибиотиков для борьбы с кишечными инфекциями в настоящее время не рационально по причине высокой вероятности спонтанного появления антибиотикорезистентных патогенов бактериальной природы. В качестве альтернативы антибиотикам в последние годы активно рассматриваются бактериофаги - вирусы, специфически лизирующие бактериальные клетки патогенных микроорганизмов [1, 2].

Бактериофаги могли бы способствовать получению экологически чистых продуктов птицеводства, если бы существовали малозатратные и масштабируемые технологии приготовления препаратов бактериофагов.

Для достижения высокого уровня сохраняемости биологических свойств бактериофагов на технологических стадиях получения препарата и в процессе его хранения и применения требуется использовать недорогие, но эффективные защитные соединения.

Бактериофаги, должны быть также защищены от действия клеточных и гуморальных факторов иммунитета, литических секретов и ферментов внутренней (полостной) среды организма. Высока вероятность, что защита бактериофагов может быть достигнута при инкапсулировании или иммобилизации фаговых частиц на различных носителях, включая природные и синтетические полимеры органической природы. Например, для обработки поверхности кожных покровов успешно использовали бактериофаги, защищенные органическими полимерами, такими как карбоксиметилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза, хитозан [1,2]. Цель исследования - разработать доступную технологию приготовления сухих препаратов бактериофагов с использованием природных компонентов, традиционно входящих в состав кормов.

Материалы и методы исследований. Из основ науки ангидробиоинженерии [3] следует, что для обратимой консервации микроорганизмов, включая бактериофаги и вирусы, из них следует удалить приемлемым способом избыток влаги.

Для обезвоживания бактериофагов был использован контактно-сорбционный метод высушивания [4,5], который по своей сути близок к методу «L-высушивания». В качестве поL-высушивания».

глотителей влаги применены высушенные растительная мука или соевый протеин, мелкие или крупные фракции стандартного корма для животных и птицы. Такого рода сухие вещества после смешивания в определенном соотношении с фаговой суспензией связывают основную массу воды. Сорбированная вода затем удаляется другим способом, обеспечивая кондиции готового продукта по остаточной влажности (8-10%). Сухие препараты, содержащие жизнеБактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности способные бактериофаги, используются как добавки к корму, либо непосредственно в виде корма, что определяется дозой бактериофагов в соответствии с установками по профилактике и лечению.

Другим способом обезвоживания является сублимационное высушивание на лабораторных установках в соответствии с выбранными режимами. Подобранное сочетание защитных соединений позволяет получить после высушивания до 50% жизнеспособных бактериофаговых частиц. Лиофилизированные препараты хорошо диспергируются в воде, они пригодны для инъекционного введения, для выпаивания, а также могут использоваться для аэрозольной обработки животных и птицы.

Методика сублимационного высушивания была использована для получения препаратов с высокой концентрацией бактериофагов. Способ лиофилизации, однако, не всегда пригоден для сушки бактериофагов из-за отсутствия достоверных данных об оптимальном уровне остаточной влажности в сухих препаратах различных бактериофагов.

В качестве защитных соединений применены протеины (соевый белок), растительная мука, органические полимеры (декстраны, полиглюкин, крахмал, поливинилпирролидон), а также известные природные соединения, которые часто используются в виде кормовых добавок. Эти соединения обволакивают частицы бактериофагов и защищают их от действия внешних неблагоприятных факторов, а также при действии кислот в желудочно-кишечном тракте животного или птицы.

Бактериофаги, лизирующие бактерии Se Etert, Se Typhuru, Se Heeberg, Se Gru-puru, Se here u, Eherh, были выделены из фекальных масс птицы и сточных вод убойных цехов птицефабрик. В качестве лечебного фагового препарата использовали смесь очищенных специфических антисальмонеллезных бактериофагов (SG-3, SG-6, F62, С11 и BМ), которая была включена в состав гранул (частиц) приготовленного корма.

Бактериофаги размножали на культуре чувствительных бактерий S.Еtert в жидкой питательной среде. Концентрацию бактериофагов определяли при титровании препаратов на культуре тех же бактерий и выражали в бляшко-образующих единицах (БОЕ). Титры исходных фаговых препаратов находились в пределах 11012 - 11014 БОЕ.

Результаты и их обсуждение. В процессе разработки технологии получения сухих препаратов проведено изучение выживаемости фагов в гранулах комбикорма с использованием бактериофага Г-1, специфичного в отношении S.Etert, взятого в концентрации БОЕ/мл.

Препараты бактериофагов при использовании компонентов кормов, получали методом экструзии с последующим дроблением до достижения оптимального размера частиц (2- мм). Инструментальный контроль уровня остаточной влажности осуществляли как в процессе обезвоживания, так и при закладке бактериофаговых препаратов на хранение для последующего использования.

Обезвоживание фаговой суспензии проводили в смесителе контактно-сорбционным способом с использованием комбинаций различных носителей.

Проведенные исследования показали, что контактно-сорбционное высушивание суспензии бактериофагов на комбинациях носителей в целом дает неплохие результаты. Выживаемость бактериофагов в зависимости от варианта композиции составляла от 4,3 до 17, 3%, что сравнимо с результатами, получаемыми в таких условиях для клеток бактерий [6]. Низкая выживаемость фага при использовании сорбента - Ti2 объясняется пересушиванием материала (о.в. 0,79%), что необходимо учитывать при создании сухих бактериофаговых препаратов.

Уровень инактивации бактериофагов в процессе хранения был оценен после исследоБактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности вания герметично укупоренных кормовых препаратов, находившихся при температуре от 2 до 8 °С в течение 60 дней. Результаты представлены в таблице 1.

Таблица 1. - Сохранение жизнеспособности бактериофагов при хранении * - выдавлено через “фильеры”, гранулы высушены в токе горячего воздуха.

** - выдавлено через “фильеры”, гранулы высушены на окиси алюминия.

Из приведенных в таблице 1 результатов следует, что бактериофаги, инкорпорированные в гранулы соевого комбикорма, способны сохранять жизнеспособность, и практически не инактивируются в течение 60 дней при температуре от 2 до 8 °С.

Комплексные препараты бактериофагов, подтвердившие стабильность при длительном хранении, были использованы для лечения экспериментальных сальмонеллезной инфекции и колисептицемии у белых мышей и бройлерных цыплят.

Для моделирования сальмонеллезной инфекции у цыплят был выбран штамм S.Etert 92, вирулентные свойства которого изучены ранее на белых мышах. При заражающей дозе 1,2107 ж.м.к. оказались инфицированными сальмонеллами 66,6 % цыплят. Исходя из этих данных, для заражения цыплят выбрана доза около 1108 ж.м.к.

В опытах на белых мышах установлено, что лечение экспериментального сальмонеллеза путем выпаивания им суспензии бактериофагов является не эффективным, в то время как скармливание фагов с гранулами корма позволяет вылечить 40-50% зараженных животных.

В опытах на бройлерных цыплятах, взятых в количестве 60 особей, все цыплята получили на второй день жизни per os около 6,9х107 клеток S.Etert 92. Контрольная группа лечения не получала, а опытная имела свободный доступ к кормовым гранулам, содержащим 2 х108 БОЕ/г фаговых частиц, в течение последующих 25 дней. По окончании эксперимента в нелеченной (контрольной группе) культура сальмонелл обнаружена у 30 особей в селезенке и у 19 - в печени, в то время как в группе, потреблявшей бактериофаг в составе корма, были поражены только 2 особи (селезенка) и одна (печень).

Полученные результаты свидетельствуют об эффективном действии фагового препарата, предъявленного в составе лечебного корма, для профилактики сальмонеллеза у цыплят.

Заключение. В результате проведенных исследований разработаны лечебные формы бактериофаговых препаратов, пригодные для профилактики и лечения сальмонеллеза птиц на основе компонентов коммерческих кормов:

Сухой лиофилизированный концентрат бактериофагов (1010-1011 БОЕ/г) во флаконах и ампулах, пригодный для приготовления жидких и инкапсулированных сухих препаратов лечебно-профилактического направления.

Сухая гранулированная лечебная добавка, содержащая бактериофаги (108-109 БОЕ/г) Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности для использования с комбикормом. Готовый комбикорм, содержаший иммобилизованные бактериофаги в дозировке (106-107 БОЕ/г), достаточен для профилактического и лечебного действия. Срок хранения препаратов лечебных кормов не менее 6 месяцев, препаратов, лиофилизированных в герметично укупоренных флаконах, - не менее одного года при 2-10 °С.

1. Stanford K, McAllister TA, Niu YD et al. ral delivery systems for encapsulated bacteriophages targeted at Escherichia coli 157:H7 in feedlot cattle // J Food Prot. 2010 Jul;73(7):1304-12.

2. Ghanbari Hossein A., Averback Paul. Composition containing bacteriophage and methods of using bacteriphages to treat infections// US Patent 6,121,036 September 19, 3. Crowe JH, Hoekstra FA, Crowe LM.. Anhydrobiosis //Annu Rev Physiol. 1992; 54:579Светоч Э.А., Перелыгин В.В., А.Н.Панин и др. Биопрепарат на основе фагов для профилактики и лечения сальмонеллеза животных //Патент РФ N 2232808, 5. Светоч Э.А., Перелыгин В.В., А.Н.Панин и др. Биопрепарат на основе фагов для профилактики и лечения колибактериоза (эшерихиоза) животных //Патент РФ N 2244747, 6. Перелыгин В.В. и др. Способ контактной сушки микроорганизмов. Описание изобретения // патент N2067114, 1996.

OBTAINING DRY THERAPEUTIC PREPARATIONS

OF BACTERIOPHAGES WITH USING THE COMPONENTS

OF COMMERCIAL FODDERS

Perelygin V.V., Svetoch E.A., Pokhilenko V.D., Volozhantsev N.V.

Key words: bterphge, ehyrt, eput, the pet f fer, therpeut preprt, eterbteru.

Wrk ete t the ret f the btehgy f the preprt f the ry therpeut preprt f bterphge the b f the pet f er fer fr tretet prevetve tee f the ee f the ue by pthge eterbter.

The bte pt f phge the preprt f therpeut fer were ther b vetgte brtry br wth the vre t f trut, ug wth the preett thrugh the fer. I e w bte the ptve reut, whh tetfy but the hgh effiey f the pt f pefi bterphge (SG-3, SG-6, 11 F62), (V7811, V7817) the rprte t the pt ry fer fr the tretet the prevetve tretet f e eсherh fet br Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности УДК 619:

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ САЛЬМОНЕЛЛЕЗНЫХ ФАГОВ

ПРИ ПЕРЕРАБОТКЕ ПТИЦЫ

Подзорова Ю.А., ветеринарно-санитарный врач Серегин И.Г., кандидат ветеринарных наук, профессор Логинов И.А., кандидат биологических наук, доцент Московский государственный университет пищевых производств Ключевые слова: птица, переработка, вода, бактериофаги, сальмонеллы, тушки, полуфабрикаты, безопасность, токсикоинфекции.

Работа посвящена изучению возможности применения сальмонеллезных фагов при переработке птицы и производстве птичьих полуфабрикатов. В экспериментальных условиях установлено, что при использовании бактериофагов в питьевой воде для бройлеров перед убоем и добавлением в воду охлаждающих тушки чанов, значительно снижается содержание гомологичных микроорганизмов в тушках и полуфабрикатах из птицы.

Введение. Основной задачей ветеринарной службы предприятий мясной промышленности является охрана населения от болезней, общих для животных и человека, в том числе от токсикоинфекций различной этиологии. В последние годы токсикоинфекции стали представлять определенную проблему для человека, так как до сих пор они широко распространены во всех странах мира и достаточно часто у детей имеют летальный исход. Чаще всего регистрируют массовые вспышки токсикоинфекций сальмонеллезной этиологии при употреблении птичьего мяса и яичных продуктов.

Сальмонеллезом заражаются все виды домашней птицы. С развитием промышленного птицеводства изменились условия содержания птицы и концентрация поголовья в помещеньях, что способствует перезаражению поголовья и увеличению сальмонеллоносительства у птицы.

При убое птицы, в партии которой имелись переболевшие или носители, происходит контаминация сальмонеллами других тушек здорового поголовья. Такие тушки или полуфабрикаты представляют биологическую опасность для человека и могут быть причиной массовых вспышек токсикоинфекций сальмонеллезной этиологии. В мясе птицы чаще всего обнаруживают S.puru, реже - S.eterr, S. typhuru и др.[1, 2].Инфицирование птицы сальмонеллами обычно происходит при напольном содержании на птицефермах и при конвейерной переработке с использованием технических средств для снятия перьев и чанов с охлажденной водой. Если в начале смены контаминация тушек сальмонеллами до снятия пера выявляется у 1,3-3,6 % убитой птицы, то после тепловой обработке и снятия пера - у 2,8-12,2%, а после охлаждения в чане с водой – 22,4-36,6 % тушек. В конце смены контаминация тушек сальмонеллами возрастает в 1,5-2 раза и более [2, 3].

В производственных условиях обеззараживание воды в чане проводят с помощью раствора хлорной извести или надуксусной кислоты. Но эти химические вещества небезопасны для человека, поэтому использование их во многих странах, в том числе и в России, ограничено.

По нашему мнению, перспективным для снижения контаминации птицы сальмонеллами может быть применение фагов к наиболее распространенным и опасным для человека сальмонеллам при подготовке птицы к убою и при охлаждении тушек в чане с водой.

Бактериофагами называют вирусы бактерий, которые имеют резко выраженные паразитические свойства, обеспечивающие возможность их размножения и сохранность в клетках гомологичных видов микроорганизмов.

Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности Фаги специфичны и активны только для гомологичных микроорганизмов, они безвредны для животных, птицы и человека. Бактериофаги успешно применяются в медицине и ветеринарии, в пищевой и косметической промышленности. Их обычно обнаруживают в сточных водах. Фаги обладают активностью при температуре 10-42°С и способны лизировать гомологичные бактериальные клетки в разведениях до 1:10-8–1:10-12 [4, 5].

Мы изучили эффективность применения сальмонеллезных бактериофагов при подготовке бройлеров к убою и переработке на конвейерных линиях с использованием охлаждения тушек в чане с водой.

Материалы и методы. В работе использовали фаги, гомологичные S. puru, S.etert, S.typhuru, S.ub. Активность сальмонеллезных фагов определяли методом Аппельмана – последовательным разведением фагов в МПБ и культивированием на гомологичных клетках сальмонелл.

Микробиологические исследования тушек кур и полуфабрикатов из них проводили согласно ГОСТ 21237-75 «Мясо. Метод бактериологического анализа», ГОСТ 7702-23-93 «Мясо птицы, субпродукты и полуфабрикаты птицы. Метод выявления сальмонелл» и методических рекомендаций «Лабораторная диагностика сальмонеллезов человека и животных» (1990).

На первом этапе бройлерам через рот вводили 48 – часовую культуру сальмонелл, а сальмонеллезные фаги добавляли в питьевую воду в разведении 1:10-4- 1:10-5 в течение двух суток перед убоем. Контролем служили цыплята-бройлеры, получавшие питьевую воду без бактериофагов. После убоя цыплят проводили микробиологические исследования содержимого кишечника и определили наличие сальмонелл, гомологичных и гетерологичных применяемым фагам.

На втором этапе были отобраны тушки бройлеров, свободных от сальмонелл, поверхность которых экспериментально контаминировали культурами, гомологичными фагам. Затем подопытные тушки опускали в емкость с водой, содержащей сальмонеллезные фаги в концентрации 1:10-4-1:10-5. Контролем служили тушки бройлеров, которые после контаминирования сальмонеллами опускали в воду без добавления фагов.

Микробиологическим исследованиям подвергали все подопытные и контрольные тушки бройлеров, а также полуфабрикаты из них до обработки фагами и после нее ежедневно в течение 5 суток.

Результаты исследования. Полученные результаты исследования показали, что при выпаивании сальмонеллезных фагов через 24-36 часов достигается обеззараживание содержимого кишечника от гомологичных клеток сальмонелл. Только в отдельных пробах содержимого толстого отдела кишечника были обнаружены S. puru. В содержимом кишечника контрольных бройлеров выявляли S. puru (28,7% проб), S.etert (17,6%), S.

typhuru (7,2%), S. ub (3,7%).

При исследовании тушек бройлеров, контаминированных сальмонеллами и хранившихся при комнатной температуре (15-18С), после обработки водой с фагами число сальмонеллезных клеток на поверхности кожи через 12 часов сократилась на 32,9 - 41,2% по сравнению с контролем. Через 24 часа хранения количество гомологичных сальмонелл сократилось на 44,7 - 46,9%. На тушках, хранившихся при 18-20°С, снижение клеток сальмоС,, льмо- нелл через 12 часов достигло 85,8% по сравнению с контролем, через 24 часа – до 89,6%, через 48 часов – до 92,2%. При дальнейшем повышении температуры хранения количество гомологичных сальмонеллезных клеток на поверхности тушек, обработанных водой с фагами, снижалось до 98,2 - 98,9%. Однако, при хранении тушек бройлеров после обработки фагами при температуре 4С число сальмонеллезных клеток сокращалось в течение 1-5 суток только на 2,8 - 4,4% по сравнению с контролем. Близкие к этому получены результаты исследования Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности полуфабрикатов из подопытных и контрольных тушек бройлеров (окорочка, бедра, грудная часть, шея, крылья и др.).

Заключение. На основании полученных данных можно заключить, что сальмонеллезные фаги при выпаивании в течение двух суток в титре 1:10-4-1:10-5 через 24-36 часов ликвидирую или значительно снижают сальмонеллоносительство гомологичных культур у цыплят-бройлеров.

При убое таких бройлеров предупреждается или снижается контаминация сальмонеллами других тушек птицы данной партии.

Обработка тушек водой с сальмонеллезными фагами при хранении в остывшем состоянии снижает контаминацию поверхности гомологичными клетками сальмонелл на 32, - 98,9% по сравнению с контролем.

В зависимости от активности, сальмонеллезные фаги добавляются в питьевую воду для птицы или в чан с водой для охлаждения тушек из расчета разведения 1:10-4-1:10-5 или 1 мл фагов на 10-100 литров воды. Сальмонеллезные фаги не опасны для птицы и человека, поэтому ограничения в применении не имеют.

1. Бой Кикимото Б.Б., Обеззараживание тушек птицы с помощью бактериофагов, Материалы научной конференции по вет-санэкспертизе, посвященные 100-летию Тетерника Д.М., М. 1999, 75с.

2. Бой Кикимото Б.Б., Профилактика токсикоинфекции сальмонеллезной этиологии тушек птицы с использование бактериофагов, автореферат кандидатской диссертации, М.

2001, 20с.

3. Серегин И.Г., Никитченко В.Е., Никитченко Д.В., Ветсанэкспертиза продуктов убоя животных и птицы., М.:РУДН, 2010.

4. Флерова А.Д., Серегин И.Г., Линев С.В., Новое в применении бактериофагов, Вестник РУДН – 2008, 4-с54-57.

5. Флерова А.Д., Изучение качества и безопасности колбасных изделий при использовании сальмонеллезных бактериофагов, автореферат кандидатской диссертации, М. 2011, 24с.

УДК 578.81:[613.292+579.674]:608.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ БАКТЕРИОФАГОВ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ

ИНФИЦИРОВАНИЯ БАКТЕРИАЛЬНЫМИ ПАТОГЕНАМИ

И ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОЙ КОНТАМИНАЦИИ

ПРОДУКТОВ ПИТАНИЯ (ПО ДАННЫМ ПАТЕНТОВ

НА ИЗОБРЕТЕНИЯ)

Рубальский О.В., доктор медицинских наук, профессор, ГБОУ ВПО АГМА Минздрава России, (8512) 52-35-99, rubalsky.innovation@gmail.com Алешкин А.В., доктор биологических наук, ФБУН «МНИИЭМ им. Г.Н.

Габричевского» Роспотребнадзора, (495) 452-07-88, ava@gabri.ru Афанасьев С.С., доктор медицинских наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ, ФБУН «МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора, (495) 452-18-16, afanasievss409.4@bk.ru Алешкин В.А., доктор биологических наук, профессор, ФБУН «МНИИЭМ им.

Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора, (495) 452-18-16, info@gabrich.com Франк Н.В., ФГБОУ ВПО АГУ, +7-917-198-85-35, Po4ta_frank@yahoo.com Афанасьев М.С., доктор медицинских наук, профессор кафедры, ГБОУ ВПО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» Минздрава России, +7-916-685-52-38, maxim.afanasyev78@gmail.com Караулов А.В., доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАМН, ГБОУ ВПО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» Минздрава России, +7drkaraulov@mail.ru Рубальский Е.О., ФБУН «МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского»

Роспотребнадзора, (495) 452-18-16, e.o.rubalsky@gmail.com Рубальский М.О., ООО НПП «ВИТАФАГ», (8512) 47-87-47, vitaphage@gmail.com Ключевые слова: бактериофаги, пищевая промышленность, продукты питания, биологически активные добавки к пище, патент, изобретение.

В настоящее время в России и за рубежом проводится активный поиск новых бактериофагов и разработка композиций на их основе с целью использования в пищевой промышленности. Формируется новая ниша на рынках технологических вспомогательных средств и биологически активных добавок к пище на основе бактериофагов, что приводит к необходимости правовой охраны создаваемых объектов промышленной собственности.

Одними из первых предложили использовать бактериофаги в пищевой промышленности российские ученые. В 1978 году А.М. Колодкин и Ю.А. Колодкин предложили при выработке сыров, творога одновременно с закваской вносить в молочную смесь набор штаммов стафилококкового бактериофага для подавления развития патогенных форм стафилококка [1].

В связи с нарастающей неэффективностью химических консервантов уже более 10 лет за рубежом начались разработки и выдаются патенты на изобретения в области использования бактериофагов для обработки продуктов питания [2, 3, 4].

Для обработки пищевых продуктов предлагались бактериофаги (в том числе поливалентные бактериофаги) против сальмонелл, бактериофаг против Listeria monocytogenes, колифаг [2, 5, 6, 7, 8].

Наиболее детально композиция на основе бактериофагов, предназначенная для предотвращения бактериальной контаминации продуктов питания и упаковочных материалов, описана в изобретении, правообладателем которого является Ecolab Inc. (США) [9].

В состав композиции кроме бактериофагов в количестве 105-1011 БОЕ/мл входят буферный агент, обеспечивающий pH от 4 до 9, стимулятор, который может включать поверхностно-активное вещество, кальций, магний, жирную кислоту, терпен, терпеноид, глицерин и пропиленгликоль, а также дополнительные загущающие вещества и пенообразователи. Данный состав композиции обеспечивает сохранение активности бактериофагов в течение не менее 14 дней.

Согласно проанализированным патентам обработка пищевых продуктов фагосодержащими композициями может производится различными методами: внесением во фруктовые и овощные соки, опрыскиванием, обработкой туманом, погружением, замачиванием, нанесением пленки [2, 9].

Другим направлением использования бактериофагов в пищевой промышленности является разработка фагосодержащих биологически активных добавок к пище.

В России в 1999 году был выдан патент ЗАО «Биофит» на биологически активную добавку к пище в виде таблетки, содержащей криопорошки овощного и/или ягодного, и/или фруктового сырья, и/или бахчевых, и/или бобовых, и/или овощной зелени, и/или зерновых, Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности и/или их зародышей, и/или водорослей, и/или скорлупы, и/или растительного лекарственного сырья, и/или панцирей ракообразных, и/или рептилий, и/или раковин моллюсков. В качестве дополнительных ингредиентов данная запатентованная биологически активная добавка к пище содержит фаги, например, антистафилококковый бактериофаг[10].

В 2009 году в России были запатентованы варианты биологически активных добавок, содержащих видоспецифические вирулентные бактериофаги и бактериофаги с индуцированной вирулентностью с литической активностью 10-4 по Аппельману в отношении тестштаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий в фильтрате фаголизата или фильтрате концентрата фаголизата, или в сухой биомассе фильтрата фаголизата нелизогенных бактерий. В качестве бактериофагов в состав данных биллогически активных препаратов могут быть включены стафилококковый бактериофаг, стрептококковый бактериофаг, коли бактериофаг, протейный бактериофаг, синегнойный бактериофаг, сальмонеллезный бактериофаг, шигеллезный бактериофаг, энтерококковый бактериофаг и клебсиеллезный бактериофаг [11, 12].

Перечень целевых добавок согласно этим запатентованным изобретениям обеспечивает получение биологически активных добавок к пище в виде суспензии, порошка, таблеток и капсул.

Таким образом в России и за рубежом активно проводятся как поиск новых бактериофагов, пригодных для использования в пищевой промышленности, так и разработка эффективных фагосодержащих композиций, что свидетельствует о развивающейся новой нише пищевых добавок и биологически активных добавок к пище.

1. Способ подавления развития патогенных форм стафилококка в сыре [Текст] : авторское свидетельство 910144 СССР : МПК3 А 23 С 19/00 / Колодкин А. М., Колодкин Ю. А. ;

заявитель Иркутский государственный университет им. А.А. Жданова. – № 2656626/28 ; заявл.

10.08.1978 ; опубл. 07.03.1982, Бюл. 2. Bacteriophage composition useful in treating food products to prevent bacterial contamination [Text] : patent US6461608 : IPC A 23 L 3/3463, A 23 L 3/3571, A 61 K 35/74, C 12 N 15/09, C 12 N 7/02, A 01 N 63/00 / Averback P., Gemmell J. – US20000718093 20001122 ; filed 22.11. ; pub. date 08.10. 3. Method for storing food and agricultural products [Text] : patent GEU2003972 : IPC A L 3/00 / Kalandarishvili L. – GE2002AU01099U 20021114 ; filed 14.11.2002 ; pub. date 10.04. 4. Bacteriophage composition useful in treating food products to prevent bacterial contamination [Text] : patent NZ549568 : IPC A 23 L 3/3463, A 61 K 35/74, C 12 N 7/00 / Averback P., Gemmell J. ; assignee Nymox Pharmaceutical Corp. – NZ20010549568 20011115 ; filed 22.11. ; pub. date 31.01. 5. Separated coliphage and application as biological fungicide in foods and anti-infection contamination thereof [Text] : patent CN101220349 : IPC A 01 N 63/00, A 23 L 3/3463, A 61 K 35/76, A 61 P 31/04, C 12 N 7/00 / Zhiying Zhang, Lei Liu ; assignee Zhuhai Jinping Technologies Co., Ltd. – CN20071031415 20071116 ; filed 16.11.2007 ; pub. date 16.07. 6. Separated Listeria monocytogenes bacterial virus and uses thereof [Text] : patent CN101220350 : IPC A 01 N 63/00, A 23 L 3/3463, A 61 K 35/76, A 61 P 31/04, C 12 N 7/00 / Zhiying Zhang, Lei Liu ; assignee Zhuhai Jinping Technologies Co., Ltd. – CN20071031416 20071116 ; filed 16.11.2007 ; pub. date 16.07. 7. Salmonella bacteriophage and application thereof [Text] : patent CN102041247 : IPC A 23 L 3/3571, C 12 N 7/00, C 12 R 1/92 / Hongduo Bao [et al.] ; assignee Jiangsu Academy of AgriБактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности cultural Sciences. – CN20101508259 20101015 ; filed 15.10.2010 ; pub. date 07.11. 8. Bacteriophage and antibacterial composition comprising the same [Text] : patent US2013022579 : IPC A 61 K 35/76, A 61 P 31/04, C12N7/00 / In Hye Kang [et al.] ; assignee CJ Cheiljedang Corporation. – US201213621730 20120917 ; filed 24.12.2008 ; pub. date 24.01. 9. Bacteriophage treatment for reducing and preventing bacterial contamination [Text] : patent US2009246336 : IPC A 23 L 3/3571, A 61 K 35/76, B 65 B 55/00, C 02 F 3/34 / Burnett S. L.

[et al.] ; assignee Ecolab Inc. – US20080054806 20080325 ; filed 25.03.2008 ; pub. date 01.10. 10. Биологически активная пищевая добавка в дозированной форме [Текст] : пат.

2129393 Рос. Федерация : МПК A 23 L 1/30, A 61 K 35/78 / Груздева А. Е. [и др.] ; заявитель и патентообладатель ЗАО «Биофит». – № 98107741/13 ; заявл. 23.04.1998 ; опубл. 27.04. 11. Композиция на основе бактериофага (варианты) [Текст] : пат. 2366437 Рос. Федерация : МПК A 61 K 35/74, A 61 P 31/04 / Алешкин В. А. [и др.] ; заявитель и патентообладатель ООО «Амфита». – № 2007139680/15 ; заявл. 29.10.2007 ; опубл. 10.09.2009, Бюл. № 12. Иммунобиологический бактерицидный препарат (варианты) [Текст] : пат. Рос. Федерация : МПК C 12 N 7/00, A 61 K 35/76, A 61 P 31/04 / Алешкин В. А. [и др.] ; заявитель и патентообладатель ООО «Амфита». – № 2007139681/13 ; заявл. 29.10.2007 ; опубл.

10.09.2009, Бюл. №

BACTERIOPHAGES APPLICATION FOR BACTERIAL PATHOGENS

INFECTION PROPHYLAXIS AND BACTERIAL CONTAMINATION

PREVENTION FOR FOOD (ACCORDING TO PATENTS FOR INVENTION)

Rubalsky O.V., Aleshkin A.V., Afanas’ev S.S., Aleshkin V.A., Frank N.V., Afanas’ev M.S., Karaulov A.V., Rubalsky E.O., Rubalsky M.O.

Key words: bterphge, f utry, f, etry uppeet, ptet, vet.

bterphge evepet theref pt fr ue the f utry. A ew he fre the rket f preg etry uppeet, be bterphge, whh reut t eety fr rete utr prperty prtet.

СРЕДСТВА ИНДИВИДУАЛЬНОЙ ЗАЩИТЫ НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ

ДЛЯ РАБОТЫ С ПАТОГЕННЫМИ БИОЛОГИЧЕСКИМИ АГЕНТАМИ

(ПБА) I-IV ГРУППЫ ПАТОГЕННОСТИ ОДНОРАЗОВОГО

И МНОГОРАЗОВОГО ПРИМЕНЕНИЯ

ООО «Лаборатория технологической одежды»

Тел: +7 (3513) 545402, 527272, e-mail: ooolto2@mail.ru Ключевые слова: противочумная одежда, комплектность, применяемые материалы.

Работа посвящена вопросу разработки средств индивидуальной защиты нового поБактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности коления для работы с БА I-IV группы патогенности (противочумной одежды). Дано описаIV ние используемого материала для изготовления противочумной одежды и его преимущества, даны рекомендации по обработке изделий, представлен список изделий, одобренных после проведенных испытаний рядом ведущих институтов России, определена область применения противочумной одежды.

ООО «Лаборатория Технологической Одежды» (LAMSYSTEMS) разрабатывает и гоLAMSYSTEMS) ) товит к серийному выпуску средства индивидуальной защиты нового поколения для работы с патогенными биологическими агентами (ПБА) I-IV группы патогенности одноразового и многоразового применения.

При разработке средств индивидуальной защиты ООО «Лаборатория Технологической Одежды» основывалось на действующих санитарных правилах СП 1.3.1285-03 и рекомендациях сотрудников учреждений Роспотребнадзора (Управления, Центры гигиены и эпидемиологии, противочумные институты, противочумные станции), федеральных государственных учреждений науки, научно-исследовательских институтов РАМН, профильных научно-исследовательских институтов России.

В процессе разработки специалисты сошлись во мнении, что в зависимости от характера выполняемой работы и степени ее опасности для персонала, необходимо утвердить несколько типов защитной одежды:

I тип – обеспечивает защиту кожных покровов рук, поверхности тела, лица, органов дыхания, органов зрения;

II тип – обеспечивает защиту кожных покровов рук, поверхности тела, лица, органов дыхания;

III тип – обеспечивает защиту кожных покровов рук, поверхности тела;

IV тип – обеспечивает защиту поверхности тела.

Изделия, разрабатываемые ООО «Лаборатория технологической одежды», предназначены для защиты кожных покровов рук и поверхности тела.

Основной упор при разработке изделий был посвящен подбору качественного материала, способного защитить поверхность тела человека от ПБА I-IV группы патогенности в случае биологической аварии.

Для изготовления СИЗ по типу противочумных костюмов наряду с использованием хлопчатобумажных тканей для изготовления многоразовой одежды было предложено испольБактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности зовать ткани из непрерывных синтетических микрофиломентных нитей с заданными барьерными свойствами и отсутствием пылеворсоотделения, а для одноразовой одежды нетканые материалы (на основе термоскрепленного полипропилена) с мембранным покрытием.

От материала, используемого для изготовления противочумной одежды, зависит качество защиты оператора, работающего с ПБА I-IV группы патогенности. В текущих условиях пыление, легкое проникновение жидкостей и микроорганизмов ограничивает использование тканей из хлопка в современных лабораториях в качестве одежды и укрывных материалов.

По сравнению с одноразовой одеждой, костюмы из синтетических микрофиломентных нитей имеют преимущества по своим защитным свойствам и высокому уровню комфорта.

Современные СИЗ для работы с ПБА I-IV группы патогенности должны обладать следующими преимуществами:

· устойчивость к проникновению микробов, бактерий, вирусов, · устойчивость к проникновению жидкостей (таких как вода, кровь, йод и др.);

· стойкость ко всем видам механического воздействия;

· защита от ворса, пыли, пуха и других мелких частиц;

· износоустойчивость к стиркам и автоклавированию.

Для того чтобы считать изделия пригодными для использования в качестве СИЗ для работы с ПБА I-IV группы патогенности было принято решение об утверждении методики исIV пытаний для проверки свойств изделий. Методики представлены в таблице 1.

Микробная проницаемость в 2 Микробная чистота В соответствии со стандартом ЕН ИСО 11737- Международный стандарт ИСО 9073-10 предусмаЧистота в части инородных тривает проведение испытаний в ламинарном шкафу.

частиц Важно подтвердить, что ламинарный поток сохраняется в том случае, когда оборудование, необходимое 4 Пылеворсоотделение 5 Прочность на разрыв В соответствии со стандартом ЕН ИСО 13938- 6 Прочность на растяжение состоянии в продольном и поперечном направлениях) В результате испытаний материала, выбранного специалистами ООО «Лаборатория Технологической Одежды» для производства многоразовой одежды для работы с ПБА I-IV группы патогенности, тесты показали, что средняя бактериальная проницаемость данного материала в сухом состоянии 154 КОЕ. Поскольку параметр бактериальной проницаемости один из основных параметров в организации защитных свойств противочумного костюма специалисты сошлись во мнении, что применения данного материала допустимо для производства противочумных комплектов нового поколения.

Тестовые партии средств индивидуальной защиты нового поколения в виде противоБактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности чумных халата, комбинезона, капюшона, пижамы и других изделий многоразового и одноразового применения были направлены в ФКУЗ Волгоградского НИПЧИ Роспотребнадзора и ФКУЗ РосНИПЧИ «Микроб» на проведение испытаний. В результате тестирования продукции ООО «Лаборатория технологической одежды» большинство изделий получили положительный отзыв.

ФКУЗ Волгоградского НИПЧИ Роспотребнадзора провел тестирование изделий из микрофиломентных нитей в отношении использования различных дезинфектантов и способов обработки. В результате испытаний было выявлено, что изделия многоразового применения выдерживают способы обработки, указанные в таблице 2.

1. Обеззараживание в соответствии с требованиями СП 1.3.1285-03 с использованием автоклавирования 1-2Атм. - 1-2ч.

2. Замачивания в перекиси водорода и хлорамине в соответствие с СП 1.3.1285- 3. Обработка хлорапином 3% - 120 минут.

4. Обработка септолетом 1% - 60 минут.

5. Обработка Форэкс-хлор комплитом 0,2% - 60минут.

Полученные результаты свидетельствуют о возможности использования данных препаратов для обеззараживания изделий многократного использования без потери первоначальных защитных свойств материала Изделия одноразового использования также могут быть обеззаражены в соответствии с требованиями СП 1.3.1285-03 с использованием автоклавирования 1-2Атм. 1-2ч., замочены в перекиси водорода и хлорамине в соответствие с СП 1.3.1285-03, после чего утилизированы.

В таблице 3 представлены изделия, одобренные ФКУЗ Волгоградского НИПЧИ Роспотребнадзора и ФКУЗ РосНИПЧИ «Микроб» после проведения испытаний.

Таблица 3 - Одобренные изделия КБ.18 Комбинезон без капюшона пояс из боковых швов.

полиэфир+антистатическая нить Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности БХ.ТГ.1 Бахилы на твердой подошве, с гипалоном, с застежкой молнией.

полиэфир+антистатическая нить КБ.Ш7 Комбинезон с капюшоном.

полиэфир+антистатическая нить ШЛ.Р.11 Шлем полиэфир+антистатическая нить ХЛ.21 Халат тип I (застежка кнопки) полиэфир+антистатическая нить.

Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности ХЛ.20 Халат тип I на завязках.

(Э-11-2) Материал 100% полиэфир+антистатическая нить.

ШЛ.03 Шлем без молнии одноразовый, ткань ШП.Р1 Шапочка с резинкой одноразовая, ткань КБ.О.01 Комбинезон с капюшоном, материал БХ.О.01 Бахилы на завязках материал SMS. Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности Арт. 88808 KIMTECH PURE* A5 Стерильные бахилы Перчатки анатомические особо прочные

DERMAGRIP HIGH RISK PWDER

В отношении некоторых изделий мнения ФКУЗ Волгоградского НИПЧИ Роспотребнадзора и ФКУЗ РосНИПЧИ «Микроб» разошлись. Результат представлен в таблице 4.

Таблица 4 - Изделия, по которым мнения специалистов разошлись ХЛ.О. (Э-119) Халат хина противочумном использоварургический материал SMS Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности 10 пленками На основании полученных данных ООО «Лаборатория Технологической Одежды»

приступило к доработке изделий. Описание и эскизы доработанных изделий представлены в таблице 4.

Таблица 5 - Доработанные изделия 2 Шлем с разъемной молнией Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности Пижама (нательное белье) с длинной застежкой Пижама (нательное белье) с короткой застежкой Комбинезон без капюшона с добавлением фильтромодуля для 5 снижения температуры пододежного пространства и двойная планка без Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности Комбинезон с капюшоном фильтромодуля для 6 снижения температуры пододежного пространства В настоящее время ООО «Лаборатория Технологической Одежды» направило предложение на проведение тестирования средств индивидуальной защиты нового поколения для работы с ПБА I-IV группы патогенности ряду учреждений Роспотребнадзора (Управления, Центры гигиены и эпидемиологии, противочумные институты, противочумные станции), федеральных государственных учреждений науки, научно-исследовательских институтов РАМН, профильных научно-исследовательских институтов России.

На основании заключений и предложений, полученных от специалистов ведущих государственных учреждений страны в области обеспечения биологической безопасности, противочумные комплекты будут доработаны и запущены в серийное производство.

В основу работы был положен принцип, при котором специалисты, выполняющие работы с ПБА I-IV группы патогенности, непосредственно участвуют в создании средств индивидуальной защиты нового поколения, что позволяет говорить о том, что изделия будут максимально приспособлены к условиям эксплуатации при выполнении каждого конкретного типа работ и будут соответствовать требованиям конечных пользователей.

DISPOSABLE AND REUSABLE PERSONAL PROTECTIVE EQUIPMENT

FOR THE NEW GENERATION OF PATHOGENIC BIOLOGICAL AGENTS

Key words: At-Pgue thg, petee, the ter ue.

Th pper ree the evepet f ew geert f per prtetve equpet fr ue wth PBA 1-4 pthgety grup (t-pgue thg). There erpt f the ter ue fr the ufture f t-pgue the h vtge, reet the preg f prut, gve t f prut pprve fter the tet, etfy re f tpgue thg.

Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности УДК 619:

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ БАКТЕРИОФАГОВ ПРИ РЕАЛИЗАЦИИ ЖИВОЙ

ПРУДОВОЙ РЫБЫ

Серегин И.Г., кандидат ветеринарных наук, профессор Московский государственный университет пищевых производств Ключевые слова: вода, рыба, бактериофаги, бактериальное обсеменение, возбудители токсикоинфекций, безопасность.

Работа посвящена изучению возможности применения сальмонеллезных, эшерихиозных, псевдомонозных бактериофагов при транспортировке и реализации живой прудовой рыбы. В экспериментальных условиях установлено, что с помощью бактериофагов в количестве 1х10-4-1х10-5 можно снизить количество гомологичных фагам микроорганизмов в воде и мясе рыбы из торговых емкостей при температуре около 10-15оС.

Введение. Бактериофаги, как «пожирателей бактерий» относят к особым представителям царства вирусов, которые могут использовать бактериальные клетки для увеличения своей популяции. Бактериофаги, при взаимодействии с гомологичными бактериальными клетками, вызывают их разрушение, при котором в каждой бактерии образуются 10 - 200 новых фагов.

Полный цикл действия фагов с момента заражения бактерии до появления новых популяций фаговых частиц составляет 10-40 минут, в зависимости от температуры воды.

С момента открытия Эрнестом Ханкиным (1896 г.) первых фагов, уже известно около 400 видов «пожирателей микробных клеток». Они успешно применяются в медицине, ветеринарии, в пищевой и косметической промышленности. Бактериофаги используются при лечении гнойных ран, при диагностике болезней и идентификации микроорганизмов. Кроме того, имеются сообщения (Бой К.К., 2001; Флерова А.Д., 2011) об использовании сальмонеллезных и эшерихиозных фагов при переработке птицы и выработке колбасных изделий.

Известно, что источником возбудителей токсикоинфекций (сальмонеллы, патогенные эшерихии, псевдоманады и др.) достаточно часто отмечают рыбу, добытую из водоемов, в которую попадают стоки с ферм, от жилых массивов или боенских предприятий. Поэтому, с целью повышения биологической безопасности прудовой рыбы, необходим поиск методов снижения контаминации ее возбудителями пищевых инфекций другими микроорганизмами, являющимися опасными для потребителей. По нашему мнению, одним из путей решения данной проблемы, является использование бактериофагов при перевозке и реализации живой рыбы.

Бактериофаги безвредны, не оказывают отрицательного влияния на живой организм, они сохраняют биологическую активность при 10-42оС. Лизирующая способность различных бактериофагов, сохраняется при их разведении до 1х10-6-1х10-12. Вместе с тем работ, посвященных использованию фагов для снижения уровня микробной безопасности товарной живой рыбы до сих пор в литературных источниках не выявлено, что и послужило основанием для наших исследований.

Материалы и методы исследований. Работа выполнена в экспериментальных условиях при обработке фагами воды в цистернах и торговых емкостях с живым карпом, предназначенным для продажи населению. Предварительно бактериофаги были получены из сточных вод, идентифицированы и оценены по активности общепринятыми методами. В опытах применяли сальмонеллезные фаги к S. etert и S. typhuru, а также к E. с (О26, О57) и P.

аerug. Активность используемых фагов составляла 1х10-5 – 1х10-9. Бактериофаги добавляли в воду с рыбой при температуре 10-15оС из расчета их содержания около 1х10-4 – 1х10-5 или 1 мл специально подготовленных бактериофагов добавляли в 10-100 л воды, а на 1 тонну воды Бактериофаги в Биотехнологии и пищевой промышленности до 100 мл фагов. Отбор проб воды и рыбы для исследования проводили 2 раза в сутки в течение 48 часов, при содержании рыбы в воде в транспортных цистернах и торговых емкостях при температуре 12-15оС. Контролем служили цистерны и торговые емкости с живой рыбой, в воду которых фаги не добавляли. При этом из подопытных и контрольных объектов делали микробиологические посевы воды и спинных мышц рыбы с целью определения общей бактериальной загрязненности и наличия бактерий рода сальмонелла, эшерихия и псевдомонас.

Результаты исследований и их обсуждение. Проведенные микробиологические исследования показали, что при добавлении сальмонеллезных, эшерихиозных и псевдомонозных фагов в воду с товарной живой рыбой, обеспечивает снижение общей бактериальной загрязненности воды на 17,6-21,9% и тканей рыбы на 11,4-13,6% по сравнению с контрольными образцами воды и рыбы. При этом, гомологичные к фагам клетки сальмонелл, эшерихий и псевдомонад в подопытных емкостях не выделяли, а в контрольных образцах воды и рыбы отдельные из них выявляют 42-67% проб. В подопытных емкостях с водой живая рыба проявляла все признаки биологической активности с нормальным движением жаберных крышек и плавников. Такая рыба плавала спинкой вверх, сохраняя при этом чистую и плотно прилегающую чешую, естественную ее окраску. За этот период в контрольных емкостях отдельные экземпляры карпа снижали плавательную активность, и изменяли свое расположение в воде, группируясь при этом в верхних слоях воды. При лабораторном исследовании спинных мышц подопытной и контрольной рыбы физико-химические показатели не имели выраженных отличий. Вместе с тем, в мясе рыбы из емкостей с водой, обработанной фагами, общая микробная загрязненность была на 11,4-13,6% ниже по сравнению с мясом рыбы из контрольных емкостей. Рыба, изъятая из емкостей с водой, обработанной фагами, в снулом виде приобретала отдельные признаки порчи на 11-13 часов позже, по сравнению с рыбой, изъятой из контрольных емкостей.

Заключение. Добавление сальмонеллезных, эшерихиозных и псевдоманозных фагов в количестве 1х10-4 – 1х10-5 в емкости с водой при перевозке и реализации рыбы, обеспечивает снижение бактериального загрязнения не только воды, но и рыбы. При этом, культуры гомологичные фагам сальмонелл, эшерихий коли и псевдомонад в опытных объектах практически не выявляются, что способствует сохранности снулой рыбы более длительный срок без признаков порчи. Эти данные дают основания считать, что использование различных бактериофагов при перевозке и реализации живой рыбы имеет перспективу для повышения биологической безопасности рыбы и рыбных продуктов, в том числе с целью профилактики токсикоинфекций у людей употребляющих рыбу, хранившуюся определенное время в торговых емкостях в живом виде. Однако, режимы применения бактериофагов при перевозке и реализации прудовой рыбы, необходимо совершенствовать до получения оптимальных результатов ее обеззараживания.

1. Сулаквелидзе А., «Бактериофаги. Биология и практическое применение», 2. Бой Кикимото Баширу Бависе, «Профилактика токсикоинфекций сальмонеллезной этиологии тушек птицы с использованием бактериофагов», автореферат кандидатской диссертации, 3. Голубев В.Н., Назаренко Т.Н., Цыбулько Е.И., «Обработка рыбы и других морепродуктов»

4. ГОСТ 24896-81 Рыба живая. Технические условия 5. Флерова А.Д., «Изучение качества и безопасности колбасных изделий при использовании сальмонеллезных бактериофагов», автореферат кандидатской диссертации, 6. Хейс У. Генетика бактерий и бактериофагов, пер. с англ., М., 7. Элизабет Кюттер Фаговая терапия: бактериофаги как анибиотики (PHAGE THERAPY: BACTERIPHAGES AS ANTIBITICS Elizabeth Kutter, Evergreen State College, lympia, WA 98505 – Nov., 1997 ).

Горшков И.Г, Куклина Н.Г., Викторов Д.А., Насибуллин И.Р., Васильев Д.А., Золотухин С.Н.

ВЫДЕЛЕНИЕ БАКТЕРИОФАГОВ AEROMONAS SALMONICIDA

Горшков И.Г., Куклина Н.Г., Викторов Д.А., Насибуллин И.Р., Васильев Д.А., Золотухин С.Н.

ПЕРСПЕКТИВЫ ПРИМЕНЕНИЯ БАКТЕРИОФАГОВ ДЛЯ ИНДИКАЦИИ ПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ РОДА AEROMONAS

Гринева Т.А., Викторов Д.А., Васильев Д.А.

ОПТИМИЗАЦИЯ СХЕМЫ ВЫДЕЛЕНИЯ БАКТЕРИОФАГОВ PSEUDOMONAS

CHLORORAPHIS

Затевалов А.М., Киселева И.А., Копанев Ю.А., Алешкин А.В., Афанасьев С.С., Селькова Е.П.

ВЛИЯНИЕ БАКТЕРИОФАГОВ НА МИКРОФЛОРУ ТОЛСТОЙ КИШКИ

Капустин А. В., Моторыгин А. В.

ЗНАЧЕНИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ФАГОВ ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ

BACILLUS ANTHRACIS

Катаева Л. В., Вакарина А. А.

ОЦЕНКА ЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ НЕКОТОРЫХ БАКТЕРИОФАГОВ

Кудрякова Т.А., Македонова Л.Д., Гаевская Н.Е., Качкина Г.В.

БАКТЕРИОФАГИ ПАТОГЕННЫХ ДЛЯ ЧЕЛОВЕКА ВИБРИОНОВ

Ленев С.В.

БАКТЕРИОФАГИ ПРИ САЛЬМОНЕЛЛЕЗЕ КУР

Лыско К.А., Игнатьев Г.М., Отрашевская Е.В.

ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ БАКТЕРИОФАГОВ: КРАТКИЙ ОБЗОР

Ляшенко Е.А., Васильев Д.А., Золотухин С.Н.

ИНДИКАЦИЯ БАКТЕРИЙ РОДА KLEBIELLA,С ПОМОЩЬЮ СПЕЦИФИЧЕСКИХ БАКТЕРИОФАГОВ, В ОБЪЕКТАХ ВЕТЕРИНАРНОГО НАДЗОРА

Мидленко В.И., Золотухин С.Н., Шевалаев Г.А., Ефремов И.М., Пичугин Ю.В.

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ БАКТЕРИОФАГОВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ С ИНФЕКЦИОННЫМИ ОСЛОЖНЕНИЯМИ

В КЛИНИКЕ ТРАВМАТОЛОГИИ И ОРТОПЕДИИ

Насибуллин И.Р., Куклина Н.Г., Горшков И.Г., Викторов Д.А., Васильев Д.А., Нафеев А.А.

ИССЛЕДОВАНИЕ ЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ БАКТЕРИОФАГОВ

AEROMONAS HYDROPHILA

Парамонова Н.А., Викторов Д.А., Васильев Д.А., Золотухин С.Н.

О ПЕРСПЕКТИВАХ ФАГОДИАГНОСТИКИ ФЛАВОБАКТЕРИОЗОВ РЫБ

Пименов Н.В.

БАКТЕРИОФАГИ В БОРЬБЕ С САЛЬМОНЕЛЛЕЗОМ ПТИЦ

Пугачев В.Г., Тотменина О.Д., Тимакова О.И., Агиенко А.И., Юшков Ю.Г., Леонов С.В., Селиверстова Н.А.

ИССЛЕДОВАНИЕ ФАРМАКОКИНЕТИКИ САЛЬМОНЕЛЛЁЗНЫХ БАКТЕРИОФАГОВ В ОРГАНИЗМЕ ЦЫПЛЯТ КРОССА ИЗА

Романова Л.В., Мишанькин Б.Н., Кудрякова Т.А., Бородина Т.Н., Македонова Л.Д., Гаевская Н.Е., Качкина Г.В.

МОЛЕКУЛЯРНОЕ ТИПИРОВАНИЕ (RAPD-АНАЛИЗ) ДНК- СОДЕРЖАЩИХ

БАКТЕРИОФАГОВ ПАТОГЕННЫХ ИЕРСИНИЙ

Скобликов Н.Э., Зимин А.А.

ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ НЕТРАНСДУЦИРУЮЩИХ БАКТЕРИОФАГОВ ДЛЯ

ПРОФИЛАКТИКИ И ТЕРАПИИ КИШЕЧНОГО ЭШЕРИХИОЗА СВИНЕЙ

Слободенюк В.В., Воропаева Е.А., Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Караулов А.В., Афанасьев М.С.

ПЕРСПЕКТИВЫ ПРИМЕНЕНИЯ БАКТЕРИОФАГОВ В ПРОФИЛАКТИКЕ И

ЛЕЧЕНИИ НОЗОКОМИАЛЬНЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ В ХИРУРГИИ

Плешакова В.И., Степанов Д.Н.

ФАГОТЕРАПИЯ САЛЬМОНЕЛЛЁЗА КУР С УЧЕТОМ ОСОБЕННОСТЕЙ ТЕХНОЛОГИИ ВЫРАЩИВАНИЯ ПТИЦЫ

Фурсова Н.К., Карцев Н.Н., Ивашов С.В., Светоч Э.А.

АНТИБИОТИКОУСТОЙЧИВОСТЬ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ПАТОГЕНОВ: ЭВОЛЮЦИОННЫЕ МЕХАНИЗМЫ И КЛИНИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Храмов М. В., Костенко Ю. Г., Воложанцев Н.В., Перелыгин В.В., Веревкин В.Н., Светоч Э.А.

ИЗУЧЕНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ БАКТЕРИОФАГОВ ДЛЯ ОБРАБОТКИ ПТИЦЫ ЗАРАЖЕННОЙ САЛЬМОНЕЛЛЕЗОМ

Doskar J., Varga M., Maslanova I., Pantucek R., Mosa M.

BACTERIOPHAGE TRANSDUCTION OF MOBILE GENETIC ELEMENTS IN

METHICILLIN-RESISTANT STAPHYLOCOCCUS AUREUS

Pantucek R., Petras P., Doskar J., Ruzickova V., Bostik J., Mosa M.

COMPARISON OF IN VITRO LYTIC ACTIVITIES OF THREE BACTERIOPHAGE

PREPARATIONS STAFAL®, STAPHYLON® AND PYOBACTERIOPHAGUM

LIQUIDUM AGAINST METHICILLIN RESISTANT STAPHYLOCOCCUS AUREUS

Алешкин А.В., Воложанцев Н.В., Светоч Э.А., Афанасьев С.С., Веревкин В.В., Васильев Д.А., Золотухин С.Н., Киселева И.А.

СПЕЦИАЛИЗИРОВАННЫЙ ПРОДУКТ ПИТАНИЯ «ФУДФАГ» В ПРОФИЛАКТИКЕ ПИЩЕВЫХ ИНФЕКЦИЙ

Васильева Ю.Б., Васильев Д.А., Семанина Е.Н.

ТЕХНОЛОГИЯ КОНСТРУИРОВАНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКОГО БИОПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ БАКТЕРИОФАГОВ BORDETELLA BRONCHISEPTICA И

ПЕРСПЕРТИВЫ ЕГО ПРИМЕНЕНИЯ

Григорьев В.В., Афанасьев С.С., Алешкин А.В., Селькова Е.П.

ГИГИЕНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ К РАЗМЕЩЕНИЮ, УСТРОЙСТВУ, ОБОРУДОВАНИЮ, КОНТРОЛЮ И ЭКСПЛУАТАЦИИ АСЕПТИЧЕСКИХ И КОНТРОЛИРУЕМЫХ ОБЪЕКТОВ.В.Т.Ч. И ПРИ РАБОТАХ С БАКТЕРИОФАГАМИ

Дыкман Л.А., Староверов С.А., Щеголев C.Ю., Богатырев В.А.



Pages:     | 1 |   ...   | 5 | 6 || 8 |
Похожие работы:

«UNEP/CBD/COP/7/21 Страница 112 Приложение РЕШЕНИЯ, ПРИНЯТЫЕ СЕДЬМЫМ СОВЕЩАНИЕМ КОНФЕРЕНЦИИ СТОРОН КОНВЕНЦИИ О БИОЛОГИЧЕСКОМ РАЗНООБРАЗИИ Решение Страница VII/1. Биологическое разнообразие лесов 113 VII/2. Биологическое разнообразие засушливых и субгумидных земель 114 VII/3. Биологическое разнообразие сельского хозяйства 124 VII/4. Биологическое разнообразие внутренних водных экосистем 125 VII/5. Морское и прибрежное биологическое разнообразие 159 VII/6. Процессы проведения оценок 216 VII/7....»

«CBD Distr. GENERAL КОНВЕНЦИЯ О БИОЛОГИЧЕСКОМ UNEP/CBD/COP/8/14 РАЗНООБРАЗИИ 15 January 2006 RUSSIAN ORIGINAL: ENGLISH КОНФЕРЕНЦИЯ СТОРОН КОНВЕНЦИИ О БИОЛОГИЧЕСКОМ РАЗНООБРАЗИИ Восьмое совещание Куритиба, Бразилия, 20-31 марта 2006 года Пункт 19 предварительной повестки дня* ГЛОБАЛЬНАЯ ИНИЦИАТИВА ПО УСТАНОВЛЕНИЮ СВЯЗИ, ПРОСВЕЩЕНИЮ И ПОВЫШЕНИЮ ОСВЕДОМЛЕННОСТИ ОБЩЕСТВЕННОСТИ Обзор осуществления программы работы и вариантов по продвижению дальнейшей работы Записка Исполнительного секретаря ВВЕДЕНИЕ...»

«Камчатский филиал Тихоокеанского института географии (KФ ТИГ) ДВО РАН Камчатский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства и океанографии (КамчатНИРО) Биология Численность Промысел Петропавловск-Камчатский Издательство Камчатпресс 2009 ББК 28.693.32 Б90 УДК 338.24:330.15 В. Ф. Бугаев, А. В. Маслов, В. А. Дубынин. Озерновская нерка (биология, численность, промысел). Петропавловск-Камчатский : Изд-во Камчатпресс, 2009. – 156 с. В достаточно популярной форме представлены научные данные о...»

«CBD Distr. GENERAL UNEP/CBD/COP/10/18 23 August 2010 RUSSIAN ORIGINAL: ENGLISH КОНФЕРЕНЦИЯ СТОРОН КОНВЕНЦИИ О БИОЛОГИЧЕСКОМ РАЗНООБРАЗИИ Десятое совещание Нагоя, Япония, 18-29 октября 2010 года Пункт 4.9 повестки дня ПРИВЛЕЧЕНИЕ К РАБОТЕ СУБЪЕКТОВ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ И ОСНОВНЫХ ГРУПП И УЧЕТ ГЕНДЕРНОЙ ПРОБЛЕМАТИКИ Записка Исполнительного секретаря ВВЕДЕНИЕ I. Эффективное осуществление Конвенции зависит от участия и привлечения к работе 1. субъектов деятельности и коренных и местных общин. Об этом...»

«Фундаментальная наук а и технологии - перспективные разработки Fundamental science and technology promising developments III Vol. 2 spc Academic CreateSpace 4900 LaCross Road, North Charleston, SC, USA 29406 2014 Материалы III международной научно-практической конференции Фундаментальная наука и технологии перспективные разработки 24-25 апреля 2014 г. North Charleston, USA Том 2 УДК 4+37+51+53+54+55+57+91+61+159.9+316+62+101+330 ББК 72 ISBN: 978-1499363456 В сборнике собраны материалы докладов...»

«Министтерство о образован и наук Россий ния ки йской Фед дерации Российск академия наук кая к Не еправител льственны эколог ый гический фонд име В.И. В ф ени Вернадско ого Коми иссия Росссийской Федерации по дел ЮНЕ лам ЕСКО Адми инистрация Тамбо овской облласти Ас ссоциация Объеди я иненный универсиитет имен В.И. Ве ни ернадског го Федералльное гос сударствеенное бю юджетное образоваательное учреж ждение выысшего ппрофессиоональног образо го ования Тамбоввский госсударственный теехническ униве...»

«Российская академия наук Институт озероведения РАН Российский государственный педагогический университет им. А.И. Герцена Гидробиологическое общество РАН II Международная конференция Биоиндикация в мониторинге пресноводных экосистем 10-14 октября 2011г., Санкт-Петербург ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ II International Conference Bioindication in monitoring of freshwater ecosystems 10-14 October 2011, St.-Petersburg, Russia ABSTRACTS При поддержке: Отделения наук о Земле РАН, СПб Научного Центра РАН, РФФИ...»

«УСТАВ РУССКОГО ЭНТОМОЛОГИЧЕСКОГО ОБЩЕСТВА ПРИ РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК (Принят Бюро Отделения общей биологии РАН 27 марта 1995 г.) 1. Общие положения 1.1. Русское энтомологическое общество при Российской академии наук, в дальнейшем именуемое РЭО, является некоммерческой организацией — научным обществом Отделения общей биологии при РАН — и осуществляет свою деятельность в соответствии с существующим законодательством и настоящим Уставом. 1.2. РЭО является юридическим лицом. Оно имеет свои...»

«Московский государственный университет им. М.В.Ломоносова Студенческий союз МГУ Биологический факультет ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ XIII МЕЖДУНАРОДНОЙ КОНФЕРЕНЦИИ СТУДЕНТОВ, АСПИРАНТОВ И МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ ЛОМОНОСОВ-2006 12–15 апреля 2006 г. Секция Биология Москва – 2006 УДК 57 Председатель оргкомитета секции Биология Проф. Гостимский С.А. Члены оргкомитета: С.н.с. Ботвинко И.В. Проф. Максимов Г.В. Доц. Медведева М.В. Проф. Соколов Д.Д. Проф. Онищенко Г.Е. С.н.с. Авилова К.В. Ст. преп. Сергеев И.Ю. Доц....»

«Уважаемые участники конференции! От имени Дальневосточного государственного технического рыбохозяйственного университета я рад приветствовать вас на очередной Международной научно-технической конференции Актуальные проблемы освоения биологических ресурсов Мирового океана. Я уверен, что в ходе работы мы сможем обсудить множество актуальных тем: совершенствование существующих технологий, нахождение путей оптимизации эксплуатации биоресурсов, исчезновение некоторых видов рыб, а также многие другие...»

«Учреждение образования Брестский государственный университет имени А.С. Пушкина Мониторинг окружающей среды Сборник материалов II Международной научно-практической конференции Брест, 25–27 сентября 2013 года В двух частях Часть 1 Брест БрГУ имени А.С. Пушкина 2013 2 УДК 502/504:547(07) ББК 20.1 М77 Рекомендовано редакционно-издательским советом учреждения образования Брестский государственный университет имени А.С. Пушкина Рецензенты: доктор геолого-минералогических наук, профессор М.А....»

«Труды VI Международной конференции по соколообразным и совам Северной Евразии ОСЕННЯЯ МИГРАЦИЯ СОКОЛООБРАЗНЫХ В РАЙОНЕ КРЕМЕНЧУГСКОГО ВОДОХРАНИЛИЩА М.Н. Гаврилюк1, А.В. Илюха2, Н.Н. Борисенко3 Черкасский национальный университет им. Б. Хмельницкого (Украина) 1 gavrilyuk.m@gmail.com Институт зоологии им. И.И. Шмальгаузена НАН Украины 2 ilyuhaaleksandr@gmail.com Каневский природный заповедник (Украина) 3 mborysenko2905@gmail.com Autumn migration of Falconiformes in the area of Kremenchuh...»

«Российская академия наук Институт озероведения РАН Биоиндикация в мониторинге пресноводных экосистем II Bioindication in monitoring of freshwater ecosystems II Издательство Любавич Санкт-Петербург 2011 УДК 504.064.36 Ответственные редакторы: Член-корр. РАН В.А. Румянцев, д.б.н. И.С. Трифонова Редакционная коллегия: д.б.н. И.Н. Андроникова, к.б.н. В.П. Беляков, к.б.н. О.А. Павлова, к.б.н. М.А. Рычкова Биоиндикация в мониторинге пресноводных экосистем II. Сборник материалов международной...»

«ИНФОРМАЦИОННОЕ ПИСЬМО N 1 НАУЧНО-ОБЩЕСТВЕННЫЙ КООРДИНАЦИОННЫЙ ЦЕНТР ЖИВАЯ ВОДА НАУЧНО-ОБРАЗОВАТЕЛЬНЫЙ ЭКОЛОГИЧЕСКИЙ ЦЕНТР БПИ ДВО РАН ООО Экологическое бюро Эко-Экспертиза Дорогие друзья! Приглашаем Вас принять участие в VIII Дальневосточной экологической конференции школьных и студенческих работ Человек и биосфера. В 2011 году наша конференция расширяет сферу влияния, включая регион Сибири, и приглашает к ЗАОЧНОМУ участию всех заинтересованных. Заочная конференция будет оценивать письменные...»

«Материалы международной научно-практической конференции Бактериофаги: Теоретические и практические аспекты применения в медицине, ветеринарии и пищевой промышленности Том I Ульяновск - 2013 Материалы международной научно-практической конференции Бактериофаги: Теоретические и практические аспекты применения в медицине, ветеринарии и пищевой промышленности / - Ульяновск: УГСХА им. П.А. Столыпина, 2013, т. I - 184 с. ISBN 978-5-905970-14-6 Редакционная коллегия: д.б.н., профессор Д.А. Васильев...»

«ФГБОУ ВПО Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии Ульяновская МОО Ассоциация практикующих ветеринарных врачей АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ Материалы V-й Всероссийской (с международным участием) студенческой научной конференции 25 – 26 апреля 2012 года Ульяновск – 2012 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 631 Актуальные проблемы инфекционной...»

«CBD Distr. GENERAL UNEP/CBD/COP/11/22* 10 September 2012 RUSSIAN ORIGINAL: ENGLISH КОНФЕРЕНЦИЯ СТОРОН КОНВЕНЦИИ О БИОЛОГИЧЕСКОМ РАЗНООБРАЗИИ Одиннадцатое совещание Хайдарабад, Индия, 8-19 октября 2012 года Пункт 10.1 предварительной повестки дня** МОРСКОЕ И ПРИБРЕЖНОЕ БИОРАЗНООБРАЗИЕ: ДОКЛАД О ХОДЕ РАБОТЫ ПО ОПИСАНИЮ РАЙОНОВ, СООТВЕТСТВУЮЩИХ КРИТЕРИЯМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭКОЛОГИЧЕСКИ ИЛИ БИОЛОГИЧЕСКИ ЗНАЧИМЫХ МОРСКИХ РАЙОНОВ Записка Исполнительного секретаря ВВЕДЕНИЕ I. На своем десятом совещании...»

«CBD Distr. GENERAL КОНВЕНЦИЯ О БИОЛОГИЧЕСКОМ UNEP/CBD/COP/8/2 РАЗНООБРАЗИИ 18 April 2005 RUSSIAN ORIGINAL: ENGLISH КОНФЕРЕНЦИЯ СТОРОН КОНВЕНЦИИ О БИОЛОГИЧЕСКОМ РАЗНООБРАЗИИ Восьмое совещание Бразилия, 20–31марта 2006 года ДОКЛАД О РАБОТЕ ДЕСЯТОГО СОВЕЩАНИЯ ВСПОМОГАТЕЛЬНОГО ОРГАНА ПО НАУЧНЫМ, ТЕХНИЧЕСКИМ И ТЕХНОЛОГИЧЕСКИМ КОНСУЛЬТАЦИЯМ ОГЛАВЛЕНИЕ Страница ПУНКТ 1 ПОВЕСТКИ ДНЯ. ОТКРЫТИЕ СОВЕЩАНИЯ ПУНКТ 2 ПОВЕСТКИ ДНЯ. ОРГАНИЗАЦИОННЫЕ ВОПРОСЫ A. Участники совещания B. Выборы должностных лиц C....»

«РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК УРАЛЬСКОЕ ОТДЕЛЕНИЕ РАН КОМИ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ИНСТИТУТ БИОЛОГИИ КОМИ ОТДЕЛЕНИЕ РБО МИНИСТЕРСТВО ПРИРОДНЫХ РЕСУРСОВ И ОХРАНЫ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ РЕСПУБЛИКИ КОМИ УПРАВЛЕНИЕ РОСПРИРОДНАДЗОРА ПО РЕСПУБЛИКЕ КОМИ РОССИЙСКИЙ ФОНД ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ Всероссийская конференция БИОРАЗНООБРАЗИЕ ЭКОСИСТЕМ КРАЙНЕГО СЕВЕРА: ИНВЕНТАРИЗАЦИЯ, МОНИТОРИНГ, ОХРАНА Материалы докладов 3-7 июня 2013 г. Сыктывкар, Республика Коми, Россия Сыктывкар, УДК 574.4:504(470-17+98) (063) ББК...»

«алтайский государственный университет Ботанический институт им. в.л. комарова ран Центральный сиБирский Ботанический сад со ран алтайское отделение русского Ботанического оБЩества Проблемы ботаники Южной сибири и монголии Сборник научных статей по материалам Деcятой международной научно-практической конференции (Барнаул, 24–27 октября 2011 г.) Барнаул – 2011 уДК 58 П 78 Проблемы ботаники Южной сибири и монголии: сборник научных статей по материалам X международной научно-практической...»









 
2014 www.konferenciya.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Конференции, лекции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.